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IR@PKUHSC  > 北京大学第一临床医学院  > 感染疾病科  > 期刊论文
学科主题: 感染疾病科
题名:
HBV cccDNA荧光定量检测方法的建立及应用
其他题名: Establishment and application of a real-time PCR method to detect hepatitis B virus cccDNA quantitatively
作者: 庄立伟; 陆海英; 于岩岩; 斯崇文; 于敏; 张乃临; 公维波
关键词: DNA ; 逆转录聚合酶链反应
刊名: 中华实验和临床病毒学杂志
发表日期: 2007
DOI: 10.3760/cma.j.issn.1003-9279.2007.02.029
卷: 21, 期:2, 页:182-184
收录类别: 中国科技核心期刊 ; CSCD
文章类型: Journal Article
摘要: 目的 建立一种HBV cccDNA定量检测方法,并定量检测慢性乙型肝炎患者肝组织内的cccDNA.方法 分析A-G亚型HBV DNA序列,根据其结构特点,于DNA缺口两侧高度保守区域设计引物和探针,并摸索该方法最佳反应条件,以期实现不同亚型HBV cccDNA的特异性扩增.对该方法进行特异性、敏感性及重复性检测.将扩增产物进行测序以检测方法的特异性.用102~1010拷贝/ml的标准质粒检测方法的敏感度.106拷贝/ml标准质粒30复管,以检测其重复性.取32例慢性乙型肝炎患者抗病毒治疗前后的肝穿组织,提取DNA,用该方法进行cccDNA定量,观察抗病毒治疗前后cccDNA的变化及与总HBV DNA的关系.结果 测序结果显示扩增产物为目的片段;该定量方法的敏感度为103~1010拷贝/ml;标准质粒30复管后其Ct值为29.69±0.31,变异系数为1.04%.肝内cccDNA占肝内总HBV DNA的47%~98%,平均81.5%.结论 本方法操作简便,特异性高,定量线形范围宽及重复性好,可用于科研中cccDNA的定量检测.
语种: 中文
原文出处: 查看原文
Citation statistics:
内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/41973
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作者单位: 100034,北京大学第一医院感染疾病科
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