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学科主题临床医学
酶消化差速贴壁法分离培养老年ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的研究
其他题名Isolating smooth muscle cells from corporal cavernosum of aging rats with erectile dysfunction using enzyme digestion velocity sedimentation method
张建1; 王英博1; 刘保兴1; 袁亦铭1; 吴小军1; 崔万寿1; 刘涛1; 李维仁1; 辛钟成1
关键词勃起功能障碍 细胞培养 肌细胞 老年 平滑肌
刊名中国男科学杂志
2010
DOI10.3969/j.issn.1008-0848.2010.12.001
24期:12页:3-8
收录类别中国科技核心期刊 ; 中文核心期刊 ; CSCD
文章类型Journal Article
摘要目的 探索培养老年勃起功能障碍(ED)大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞(SMCs)生物学特性稳定、细胞纯度高、简单易行的一种新方法. 方法 电生理仪检测24月龄雄性大鼠阴茎海绵体压力和平均动脉压比值(ICP/MAP)来评价阴茎勃起功能,从而选择老年ED大鼠.分别采用组织块法、酶消化法和酶消化差速贴壁法分离培养24月龄ED大鼠SMCs;采用存活率、生长曲线、相差显微镜和HE染色等,比较不同方法培养SMCs的生物学特性;免疫组化、免疫荧光和流式细胞仪通过检测α-SM-actin、Myosin和Desmin的阳性率来鉴定SMCs,并比较不同方法培养SMCs的纯度. 结果 ICP/MAP低于0.45入选老年ED大鼠组.细胞存活率提示酶消化法和组织块法存活率分别为93%和90%,酶消化差速贴壁法显著增加到99%(P<0.05);生长曲线提示酶消化差速贴壁法细胞数量在第5~7天也显著增加(P<0.05);酶消化差速贴壁法培养细胞在相差显微镜和HE染色下形态基本一致,呈梭形生长.免疫组化、免疫荧光和流式鉴定是SMCs,组织块法和酶消化法原代培养的SMCs纯度平均分别为45%和82%,酶消化差速贴壁法SMCs纯度显著增加到98%(P<0.05).α-SM-actin、Myosin和Desmin在SMCs中有大量表达,在11代以内SMCs纯度维持较高水平(95%以上). 结论 酶消化差速贴壁法快速简便,可在一定范围内提高SMCs纯度;用此法培养的SMCs,生物学特性稳定,细胞纯度高,为建立SMCs细胞株奠定基础.
语种中文
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文献类型期刊论文
条目标识符http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/42480
专题北京大学第一临床医学院_男科中心
作者单位1.北京大学第一医院男科中心,北京,100034
2.首都医科大学潞河医院泌尿外科
3.北京大学口腔医院第三门诊部
4.北京大学第一医院男科中心,北京,100034
推荐引用方式
GB/T 7714
张建,王英博,刘保兴,等. 酶消化差速贴壁法分离培养老年ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的研究[J]. 中国男科学杂志,2010,24(12):3-8.
APA 张建.,王英博.,刘保兴.,袁亦铭.,吴小军.,...&辛钟成.(2010).酶消化差速贴壁法分离培养老年ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的研究.中国男科学杂志,24(12),3-8.
MLA 张建,et al."酶消化差速贴壁法分离培养老年ED大鼠阴茎海绵体平滑肌细胞的研究".中国男科学杂志 24.12(2010):3-8.
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