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学科主题临床检验诊断学
人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化
其他题名Expression of Human Cardiac Troponin I-C in E.coli and Its Purification
闫存玲; 徐国宾; 夏铁安
关键词心肌肌钙蛋白i-c 融合蛋白 表达 纯化
刊名生物化学与生物物理进展
2004
DOI10.3321/j.issn:1000-3282.2004.09.008
31期:9页:812-817
收录类别中国科技核心期刊 ; 中文核心期刊
文章类型Journal Article
摘要提取人心肌组织总RNA,RT-PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)基因,利用人工合成的可编码19个中性氨基酸残基为主的DNA序列(Linker),将cTnI和TnC基因连接,插入到质粒pET15b中,将鉴定正确的重组pET15b质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达.结果在大肠杆菌中成功实现了全长cTnI-C融合蛋白(cTnI-linker-TnC)的稳定可溶性高表达,在摇瓶中表达量可达21 mg/L利用目的蛋白N端的组氨酸"标签"(His-tag),经一步Ni2+-Sepharose柱亲和层析纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯蛋白质.经初步研究,cTnI-C具有较好的免疫原性和稳定性,有望成为cTnI测定系统可溯源的候选参考物质,推进cTnI检测的标准化进程.
语种中文
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文献类型期刊论文
条目标识符http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/43760
专题北京大学第一临床医学院_检验科
作者单位北京大学第一医院检验科,北京,100034
推荐引用方式
GB/T 7714
闫存玲,徐国宾,夏铁安. 人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化[J]. 生物化学与生物物理进展,2004,31(9):812-817.
APA 闫存玲,徐国宾,&夏铁安.(2004).人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化.生物化学与生物物理进展,31(9),812-817.
MLA 闫存玲,et al."人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化".生物化学与生物物理进展 31.9(2004):812-817.
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