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学科主题: 临床检验诊断学
题名:
人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化
其他题名: Expression of Human Cardiac Troponin I-C in E.coli and Its Purification
作者: 闫存玲; 徐国宾; 夏铁安
关键词: 心肌肌钙蛋白I-C ; 融合蛋白 ; 表达 ; 纯化
刊名: 生物化学与生物物理进展
发表日期: 2004
DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2004.09.008
卷: 31, 期:9, 页:812-817
收录类别: 中国科技核心期刊 ; 中文核心期刊
文章类型: Journal Article
摘要: 提取人心肌组织总RNA,RT-PCR扩增出人心肌肌钙蛋白I(cardiac troponin I,cTnI)和肌钙蛋白C(TnC)基因,利用人工合成的可编码19个中性氨基酸残基为主的DNA序列(Linker),将cTnI和TnC基因连接,插入到质粒pET15b中,将鉴定正确的重组pET15b质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3)pLysS中,用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导蛋白质表达.结果在大肠杆菌中成功实现了全长cTnI-C融合蛋白(cTnI-linker-TnC)的稳定可溶性高表达,在摇瓶中表达量可达21 mg/L利用目的蛋白N端的组氨酸"标签"(His-tag),经一步Ni2+-Sepharose柱亲和层析纯化,得到了聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)纯蛋白质.经初步研究,cTnI-C具有较好的免疫原性和稳定性,有望成为cTnI测定系统可溯源的候选参考物质,推进cTnI检测的标准化进程.
语种: 中文
原文出处: 查看原文
Citation statistics:
内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/43760
Appears in Collections:北京大学第一临床医学院_检验科_期刊论文

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作者单位: 北京大学第一医院检验科,北京,100034

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闫存玲,徐国宾,夏铁安. 人心肌肌钙蛋白I-C融合蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化[J]. 生物化学与生物物理进展,2004,31(9):812-817.
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