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学科主题: 泌尿外科学
题名:
肾癌相关基因克隆--肾癌cDNA消减文库的构建
其他题名: Cloning of Renal Cell Carcinoma Relation Gene:Construction of a cDNA Subtractive Library of Human Renal Cell Carcinoma and Its Significance
作者: 张强1; 毛泽彬1; 张志文1; 辛殿旗1; 郭应禄1
关键词: 肾肿瘤 ; ; 抑制性消减杂交 ; 文库
刊名: 生物化学与生物物理进展
发表日期: 2000
DOI: 10.3321/j.issn:1000-3282.2000.03.020
卷: 27, 期:3, 页:301-304
收录类别: 中国科技核心期刊 ; 中文核心期刊
文章类型: Journal Article
摘要: 应用抑制性消减杂交技术,构建人肾癌与正常肾差异表达的cDNA消减文库.分别从肾癌及正常肾细胞系中提取poly(A)+RNA,依次合成单链及双链cDNA,经酶切成平均大小为400~600 bp的片段,将肾癌cDNA分为两组,分别与两种不同的接头衔接,再与正常肾cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR后,将产物与T/A载体连接构建成功cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增.构建成功具有高消减效率的人肾癌cDNA消减文库,非特异性cDNA片段被有效地消减,特异表达的cDNA得到富集.文库扩增后得到6500个克隆,随机挑取350个制备质粒,酶切分析均得到400~600 bp插入片段.所构建的人肾癌cDNA消减文库为进一步大批量筛选、克隆肾癌特异性表达的未知新基因奠定了基础.
语种: 中文
原文出处: 查看原文
Citation statistics:
内容类型: 期刊论文
版本: 出版稿
URI标识: http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/45630
Appears in Collections:北京大学第一临床医学院_泌尿外科_期刊论文

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肾癌相关基因克隆_肾癌cDNA消减文库的构建_张强(1).pdf(155KB)期刊论文作者接受稿限制开放 联系获取全文

作者单位: 1.北京医科大学第一临床医院,泌尿外科研究所,北京,100034
2.北京医科大学生物化学与分子生物学系
3.北京医科大学生理系

Recommended Citation:
张强,毛泽彬,张志文,等. 肾癌相关基因克隆--肾癌cDNA消减文库的构建[J]. 生物化学与生物物理进展,2000,27(3):301-304.
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