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学科主题: 临床医学
题名:
简并PCR结合RACE技术克隆马尔尼菲青霉未知基因
其他题名: Degenerate PCR Combined with RACE Cloning Unknown Gene of Penicillium Marneffei
作者: 曹存巍; 刘伟; 李若瑜
关键词: 马尔尼菲青霉 ; 简并PCR ; 快速cDNA末端扩增
刊名: 中国皮肤性病学杂志
发表日期: 2007
DOI: 10.3969/j.issn.1001-7089.2007.11.007
卷: 21, 期:11, 页:660-662
收录类别: 中国科技核心期刊 ; 中文核心期刊
文章类型: Journal Article
摘要: 目的 寻找高效克隆马尔尼菲青霉新基因的方法.方法 从生物信息库中找出已知的酿酒酵母、白念珠菌、新生隐球菌、烟曲霉、构巢曲霉SKN7氨基酸保守序列,设计简并引物,PCR扩增获得部分马尔尼菲青霉SKN7 cDNA片段,随后应用RACE技术分别扩增其5'端和3'端未知序列.结果 简并PCR扩增可产生多个条带,以预期大小1100bp处条带最清晰.5'-RAACE得一约900bp大小产物,无非特异性扩增.3'-RACE扩增产物为多条片段,其中以700bp,400bp和200bp条带相对较清晰,纯化、克隆、测序、比对分析后证实700bp大小产物为目的片段.将上述产物序列进行对位拼接,获得一全长约为2.5kb的序列,它编码的蛋白与其他物种Skn7蛋白高度同源,为马尔尼菲青霉SKN7 cDNA.结论 简并PCR结合RACE技术是一种高效、简单、有效的克隆马尔尼菲青霉新基因的方法.
语种: 中文
原文出处: 查看原文
Citation statistics:
内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/46359
Appears in Collections:北京大学第一临床医学院_皮肤性病科_期刊论文

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作者单位: 北京大学第一医院真菌与真菌病研究中心,北京,100034

Recommended Citation:
曹存巍,刘伟,李若瑜. 简并PCR结合RACE技术克隆马尔尼菲青霉未知基因[J]. 中国皮肤性病学杂志,2007,21(11):660-662.
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