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学科主题: 骨科学
题名:
转化生长因子β2真核表达载体pcDNA3.1(+)/TGF-β2的构建及其在骨髓基质细胞的表达
其他题名: pcDNA3.1(+)/TGF-β2 CONSTRUCTION AND EXPRESSION IN TRANSFECTED MARROW STROMAL CELLS
作者: 王卫国; 娄思权; 郑多; 夏家辉
关键词: 转化生长因子β2 TGFβ2 重组DNA 基因转染 骨髓基质细胞
刊名: 中国现代医学杂志
发表日期: 2003
DOI: 10.3969/j.issn.1005-8982.2003.07.007
卷: 13, 期:7, 页:19-23
收录类别: 中国科技核心期刊 ; 中文核心期刊 ; CSCD
文章类型: Journal Article
摘要: 目的:构建人转化生长因子β2的真核表达载体pcDNA3.1(+)/TGF-β2,检测其转染骨髓基质细胞后的表达.方法:用PCR方法从人胎盘cDNA文库DNA中扩增TGF-β2全长cDNA,该基因片段两端设计了NheⅠ和XhoⅠ限制性酶切位点.将所得片段连接到T载体上测序证实.利用重组DNA技术将TGF-β2的cDNA构建到真核表达载体pcDNA3.1(+)上,酶切鉴定.通过脂质体介导的转染技术,将所构建的载体导入从骨髓中分离培养的基质细胞中,体外单层培养.分别于转染后24h和4周利用RT-PCR和Western-Blotting方法检测目的基因的表达情况.结果:经琼脂糖凝胶电泳及测序证实,PCR获得的片段与GenBank中登记的TGF-β2 cDNA序列完全相同.pcDNA3.1(+)/TGF-β2酶切片段的长度与理论大小相符.转染后不同时期的骨髓基质细胞在mRNA和蛋白质水平均可检测到TGF-β2的表达.结论:pcDNA3.1(+)/TGF-β2真核表达载体构建成功,在骨髓基质细胞内可获得短暂和长期表达.
语种: 中文
原文出处: 查看原文
Citation statistics:
内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/70808
Appears in Collections:北京大学第三临床医学院_骨科_期刊论文

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作者单位: 1.北京大学第三医院骨科,北京,100083
2.中南大学中国医学遗传学国家重点实验室,长沙,410078

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王卫国,娄思权,郑多,等. 转化生长因子β2真核表达载体pcDNA3.1(+)/TGF-β2的构建及其在骨髓基质细胞的表达[J]. 中国现代医学杂志,2003,13(7):19-23.
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