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学科主题: 骨科学
题名:
人血管内皮细胞生长因子腺病毒表达系统的构建及体外表达
其他题名: Construction of adenoviral vector encoding human VEGF121 cDNA and its expression in vitro
作者: 蔡善保; 马庆军; 余希杰; 党耕町; 马大龙
关键词: 内皮生长因子 ; 血管 ; 腺病毒,人 ; 基因疗法 ; 骨髓基质细胞
刊名: 中华外科杂志
发表日期: 2002
DOI: 10.3760/j:issn:0529-5815.2002.05.019
卷: 40, 期:5, 页:379-382
收录类别: 中国科技核心期刊 ; 中文核心期刊 ; CSCD
文章类型: Journal Article
摘要: 目的构建人VEGF121 腺病毒表达载体,探讨应用血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因治疗骨科缺血性疾患的可行性. 方法采用分子克隆技术,从pCDI/VEGF121质粒获得hVEGF121cDNA,经穿梭质粒pShuttle克隆到腺病毒质粒上,构成Adeno-VEGF121腺病毒重组质粒,经酶切及测序鉴定正确后,包装成为重组Adeno-VEGF121腺病毒,并进行电镜观察及滴度测定.用病毒感染小鼠骨髓基质细胞,用逆转录PCR方法检测VEGF121 基因在骨髓基质细胞中的转录,用免疫印迹及免疫组化方法检测VEGF蛋白的表达. 结果经酶切鉴定及基因测序证实重组腺病毒质粒构建成功,电镜显示包装细胞中有病毒存在,包装的病毒滴度为8×1010 pfu/ml,RT-PCR证实有VEGF121 mRNA的转录,免疫印迹及免疫组化检测有VEGF121蛋白的表达,而对照未见VEGF121转录和表达. 结论构建的VEGF121腺病毒表达载体可在体外表达,VEGF基因治疗有可能用于骨科缺血性疾患.
语种: 中文
原文出处: 查看原文
Citation statistics:
内容类型: 期刊论文
URI标识: http://ir.bjmu.edu.cn/handle/400002259/70900
Appears in Collections:北京大学第三临床医学院_骨科_期刊论文

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作者单位: 1.北京大学第三医院骨科
2.北京大学人类疾病治疗中心

Recommended Citation:
蔡善保,马庆军,余希杰,等. 人血管内皮细胞生长因子腺病毒表达系统的构建及体外表达[J]. 中华外科杂志,2002,40(5):379-382.
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